抑郁癥是普遍的神經(jīng)精神病疾之一，全球患病率超過(guò)4.5%，其特征是持續情緒低落、興趣減退、食欲、睡眠和認知功能受損。目前可用的抗抑郁藥通常是有效的，但一些副作用，包括昏迷、癲癇發(fā)作和心臟毒性，限制了它們的廣泛分布。此外，近一半的抑郁癥患者未能獲得持續緩解，約三分之一的患者對任何干預措施均無(wú)反應。

2023年11月10日，中國藥科大學(xué)汪豪課題組在 British Journal of Pharmacology 發(fā)表研究論文，題目為《Kaempferol-3-O-sophoroside contributes to modulation of depressive-like behavior in C57BL/6J mice by activating AMPK》。研究表明，PCS-1與AMPK結合，促進(jìn)BDNF的產(chǎn)生和自噬的增強，結果達到抗抑郁作用。本研究為藏紅花花瓣的臨床應用提供了支持，并為AMPK作為抗抑郁的潛在靶點(diǎn)提供了進(jìn)一步的證據。

700 μM CORT可顯著(zhù)降低PC12細胞活力，降低至50%左右。然而，PCS-1 treatment的劑量依賴(lài)性地改善了細胞損傷。雙染色顯示，PCS-1有效抑制了CORT誘導的PC12細胞凋亡。Western blot分析顯示，與CORT處理相比，PCS-1處理后Bcl-2/Bax的比例增加，caspase-3和caspase-9的活性降低。此外，PCS-1還降低了ROS水平和MDA含量，增加了SOD活性。這些結果初步提示PCS-1在體外可能具有抗抑郁樣的特性。

本研究采用CORT誘導的抑郁小鼠模型和CUMS模型，通過(guò)多種行為測試來(lái)評價(jià)PCS-1在體內的抗抑郁樣活性。皮質(zhì)酮暴露的小鼠的體重增加明顯少于對照組，但PCS-1 treatment改善了皮質(zhì)酮引起的體重減輕，尤其是在高劑量組，其表現優(yōu)于FLU組。CORT處理小鼠SPT的蔗糖偏好降低，TST和FST的靜止時(shí)間增加，PCS-1（10和20 mg/kg）或Flu treatment減輕了CORT暴露小鼠的抑郁樣行為。PCS-1（10和20 mg/kg）或Flu treatment顯著(zhù)改善了皮質(zhì)酮誘導的運動(dòng)活動(dòng)的減少。此外，CORT treatment小鼠的海馬體積也小于對照組小鼠。經(jīng)Flu或PCS-1 treatment后，海馬體積明顯增加。這些結果表明，PCS-1改善了抑郁樣行為，并可能與抑制海馬萎縮有關(guān)。

• 蔗糖偏好實(shí)驗（sucrose preference test，SPT）

在SPT之前，所有小鼠都被單獨飼養，并在1%的蔗糖溶液中放置24小時(shí)。然后，在缺水12小時(shí)后，給每只小鼠提供兩個(gè)裝有1%蔗糖溶液和自來(lái)水的預稱(chēng)重瓶。6小時(shí)后隨機并相互交換兩瓶酒的位置，以避免空間偏好。12小時(shí)后測量并記錄蔗糖溶液和水的攝入量。蔗糖偏好（SP）值計算如下：SP（%）=蔗糖攝入量(g)/[蔗糖攝入量(g) +水攝入量(g)]×100%。

• 強迫游泳實(shí)驗（forced swim test，FST）

每只小鼠分別暴露在一個(gè)透明圓柱體（20厘米直徑20厘米），其中包含大約20厘米的水（22°C-25°C）中訓練15 min。24小時(shí)后再次將其放入氣缸中，游泳6 min，取其中4次min記錄靜止時(shí)間。

• 懸尾實(shí)驗（tail suspension test，TST）

每只老鼠都被單獨暴露在一個(gè)訓練期間，以避免實(shí)驗期間的干擾。將小鼠放置在地板上方20厘米處，倒掛6 min,適應2 min后，在接下來(lái)的4個(gè)min中測量靜止時(shí)間作為絕望的指標。

評價(jià)CORT誘導小鼠海馬中的氧化指標，進(jìn)一步評價(jià)過(guò)度氧化應激在抑郁癥發(fā)病機制中的作用。結果顯示，與模型小鼠相比，PCS-1處理降低了ROS和MDA水平，提高了SOD活性。此外，PCS-1改善了CORT誘導的海馬中Bcl-2/Bax比值的降低，并增加了海馬中caspase-3和caspase-9的表達。這些結果提示，PCS-1可能通過(guò)抑制氧化和凋亡系統，對CORT誘導的海馬損傷發(fā)揮神經(jīng)保護作用。

采用ELISA法檢測CORT處理后的PC12細胞中BDNF的水平。與CORT處理組相比，Flu或PCS-1顯著(zhù)提高了BDNF的水平，細胞immunity熒光實(shí)驗進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。Western blot結果顯示，CORT降低了PC12細胞中BDNF、p-TrkB和p-AKT的表達水平，然后PCS-1逆轉了這些表達水平。PCS- 1處理有效地保護了Neuro-2a細胞免受CORT誘導的損傷，導致神經(jīng)突的形成和延伸以劑量依賴(lài)的方式增強。此外，PCS-1單獨對Neuro-2a細胞具有增殖作用，促進(jìn)神經(jīng)突的形成和延伸，特別是在濃度為100 μM時(shí)。immunity熒光檢測顯示，與對照組相比，pcs-1處理的初級海馬神經(jīng)元中MAP2（樹(shù)突指標）和Tau（軸突指標）的表達水平顯著(zhù)升高。同時(shí)，PCS-1的使用增加了初級海馬神經(jīng)元的突起長(cháng)度和分支數量。這些結果表明，PCS-1可以上調BDNF的表達，從而促進(jìn)神經(jīng)元分化和神經(jīng)突起延伸。

綜上所述，藏紅花花瓣的主要活性物質(zhì)PCS-1顯著(zhù)改善了CORT和CUMS小鼠模型的抑郁樣行為，促進(jìn)了海馬BDNF的產(chǎn)生，減弱了CORT誘導的海馬萎縮，誘導自噬減少了NLRP3神經(jīng)炎癥。結果表明，PCS-1是一種潛在的AMPK激活因子，通過(guò)與AMPK結合，促進(jìn)BDNF的表達和誘導自噬。本研究初步闡明了藏紅花花瓣的藥效學(xué)物質(zhì)基礎和抗抑郁機制。此外，結果進(jìn)一步證明AMPK激活介導的BDNF增加和自噬增強可以改善小鼠抑郁癥狀。

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